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RNeasy Micro Kit (50)(74004)

Performance

RNeasy Micro Kit可从微量样本中得到高产量总RNA,且重复性好。从少量细胞,包括单细胞以及微量标准组织样本中都能纯化得到总RNA(参见"Reliable RNA isolation from a single cell"、"Highly reproducible yields for sensitive applications"和"High-quality total RNA from fine needle aspirates")。RNeasy Micro Kit通过高效的柱上基因组DNA消化可使珍贵的样本在定量基因表达分析中得到最大的敏感度,如real-time RT-PCR(参见"Efficient on-column removal of genomic DNA")。

Principle


RNeasy Micro Kit专用于从微量样本中纯化总RNA,如显微切割组织、细针穿刺样本、微量纤维组织包括心脏和肌肉组织、微量细胞、甚至是单细胞(如FACS筛选细胞)。处理显微切割FFPE组织,我们推荐使用RNeasy FFPE Kit。RNeasy技术整合了苯酚/异硫氰酸胍裂解的严谨性和硅胶膜纯化的速度和纯度,简化了总RNA的纯化技术。RNeasy MinElute离心柱独特的设计可确保最小的洗脱体积,小至10 µl,实现RNA的高度浓缩。小洗脱体积意味着下游的反应可控制在小体积范围内,提高反应效率。高纯度确保全部样本可用于反转录等下游应用,无酶抑制。

Procedure


RNeasy Micro Kit专用于从微量样本中纯化总RNA。先对样本(<5 mg组织或<5 x 105个细胞)进行破碎和匀浆。在裂解物中加入乙醇以提供合适的结合条件。然后将裂解物上样至RNeasy MinElute离心柱,RNA(至多45 µg)结合到硅胶膜上。RNeasy Micro Kit包含RNase-free DNase,确保简单、高效的柱上基因组DNA消化,适用于敏感的应用。DNase和其他污染物被高效洗去后,10–14 µl水洗脱得到高浓度的纯化RNA。

Applications


RNeasy Micro Kit纯化得到小洗脱体积(10 µl)RNA,重复性好,适用于敏感的定量基因表达分析,包括以单细胞为起始样本的real-time RT-PCR。


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